免離心流程–可選磁珠吸附獲得上清，避免手工離心去沉淀步驟
高產(chǎn)量–可從≤1.5mL TB培養(yǎng)基中獲得高達(dá)20μg的質(zhì)粒DNA
通用型強(qiáng)–可適用于不同類(lèi)型的培養(yǎng)基，如LB/TB等
轉(zhuǎn)染級(jí)別–可獲得<0.1 EU/μg的無(wú)內(nèi)毒素質(zhì)粒DNA
高純提取–產(chǎn)物無(wú)污染，A260/A280>1.8、A260/A230>2.0
磁珠法無(wú)內(nèi)毒素質(zhì)粒小量提取試劑盒可用于提供內(nèi)毒素水平為<0.1 EU/μg的高質(zhì)量質(zhì)粒DNA，下游產(chǎn)物可直接應(yīng)用于真核轉(zhuǎn)染和其他對(duì)內(nèi)毒素水平敏感的體外應(yīng)用。
該試劑盒基于磁珠的技術(shù)，可在≤1.5mL LB或TB或其他合適的生長(zhǎng)培養(yǎng)基中純化質(zhì)粒DNA。磁珠法無(wú)內(nèi)毒素質(zhì)粒小量提取試劑盒可在大多數(shù)開(kāi)放式全自動(dòng)移液平臺(tái)和基于磁珠法的核酸提取儀上實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化提取。純化的質(zhì)粒DNA內(nèi)毒素含量可達(dá)<0.1 EU/μg，產(chǎn)量可因質(zhì)粒的拷貝數(shù)、使用的大腸桿菌菌株、培養(yǎng)基和生長(zhǎng)條件而異。
磁珠法無(wú)內(nèi)毒素質(zhì)粒小量提取試劑盒采用改良的堿裂解法先制備出樣品裂解液，然后使用磁珠Mag-Bind®Particles LC（可按需求另購(gòu)）或通過(guò)離心分離沉淀物。新型超順磁性磁珠Mag-Bind®Particles LC會(huì)與細(xì)胞碎片發(fā)生結(jié)合，利用磁性吸附將沉淀帶出，即可實(shí)現(xiàn)無(wú)離心方案，使其更適用于高通量、自動(dòng)化的工作流程。
應(yīng)用：轉(zhuǎn)染、常規(guī)篩選、限制性?xún)?nèi)切酶消化、轉(zhuǎn)化、PCR、DNA測(cè)序、體外轉(zhuǎn)錄和其他需要純凈DNA的應(yīng)用
樣本：96孔深孔板每孔≤1.5mL過(guò)夜菌液
處理時(shí)間：95min完成1-96個(gè)樣本
結(jié)合能力：20ug
洗脫體積：50-100ul
1. 在各種質(zhì)粒類(lèi)型和培養(yǎng)基中均可高效提取
按照說(shuō)明書(shū)操作步驟，使用磁珠法無(wú)內(nèi)毒素質(zhì)粒小量提取試劑盒以及競(jìng)品公司試劑盒，從1.5mL DH5α培養(yǎng)基（n=3）中提取pGEM質(zhì)粒DNA。使用Thermo Scientific的NanoDropTM 2000c分光光度計(jì)對(duì)提取的質(zhì)粒DNA進(jìn)行測(cè)定。Omega Bio-tek試劑盒提取的質(zhì)粒內(nèi)毒素（<0.1 EU/μg）水平更低，產(chǎn)量也高于競(jìng)品公司。
2.與P公司相比，轉(zhuǎn)染效率更高
從1.5mL DH5α培養(yǎng)基（n=3）制備pGEM質(zhì)粒，并使用磁珠法無(wú)內(nèi)毒素質(zhì)粒小量提取試劑盒以及競(jìng)品公司的等效試劑盒進(jìn)行提取。使用2μL Lipofectamine轉(zhuǎn)染試劑，將200ng純化好的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到10,000個(gè)細(xì)胞中。使用Omega Bio-tek試劑盒純化的質(zhì)粒產(chǎn)生更高的生物發(fā)光信號(hào)，與競(jìng)品公司相比轉(zhuǎn)染效率更高。
3.在Hamilton Microlab®Star™上實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化質(zhì)粒提取，產(chǎn)量和純度一致
使用磁珠法無(wú)內(nèi)毒素質(zhì)粒小量提取試劑盒試劑盒從1mL DH5α培養(yǎng)基中提取pGEM質(zhì)粒，使用Hamilton Microlab® STAR™平臺(tái)進(jìn)行全自動(dòng)提取，并使用Mag-Bind® Particles LC吸附去除沉淀，用100μL洗脫獲得質(zhì)粒DNA。使用Thermo Scientific的NanoDrop™ 2000c分光光度計(jì)進(jìn)行測(cè)定，質(zhì)粒的產(chǎn)量重復(fù)性高且A260/A280≥1.8，A260/A2300≥2.0。
4.在各種質(zhì)粒類(lèi)型和培養(yǎng)基中均可高效提取
磁珠法無(wú)內(nèi)毒素質(zhì)粒小量提取試劑盒可處理各種樣品的初始條件，如不同質(zhì)粒類(lèi)型、分子量、培養(yǎng)基以及初始培養(yǎng)體積。質(zhì)粒產(chǎn)量可能因條件不同而存在差異。